All'interno dell'universo narrativo Marvel, Miles è il figlio di Rio Morales, una donna portoricana, e di Jefferson Davis, un uomo afroamericano – Miles preferisce usare il cognome della madre per evitare battute sul musicista Miles Davis.
Mettendo le abilità dei due Spider-Man a confronto, i poteri di Miles Morales sono più performanti rispetto a quelli di Peter Parker: i suoi Sensi di Ragno sono più sviluppati, e i suoi poteri esclusivi lo rendono potenzialmente lo Spider-Man più forte tra i due.
Phin è una grande amica di Miles, col quale ha però perso i contatti da molti anni; come lui è un genio della scienza, e i due hanno vinto insieme un ambitissimo premio.
Nel gioco, Miles subisce la perdita del padre, poliziotto morto in un attentato rivolto a Norman Osborn, sindaco di New York. Per cercare di andare avanti e risollevarsi, Miles inizia a collaborare con Peter al centro di volontariato FEAST, gestito da quest'ultimo e Zia May.
Nei film del MCU (Spider-Man: Homecoming, Spider-Man: Far from Home e Spider-Man: No Way Home) il principale interesse amoroso di Peter è Michelle Jones, interpretata da Zendaya, ed è un personaggio ideato appositamente per il MCU.